應用電穿孔法處理雞精子作為基因載體產生基因轉殖雞之可行性
- 期別
- 2008-041-2-0127-0138
- 作者
- 劉振發、劉瑞珍、戴謙、蕭振文、黃木秋、陳立人
- 關鍵字
- 精子載體、基因轉殖雞、α1-抗胰蛋白瓷。
- 摘要
- 將採集的新鮮精液(精液品質：活精子數 90%以上、精子活動力 3 以上)加入含有蔗糖（sucrose）等成分之電擊液及外源抗胰蛋白瓷基因混合，經電融合處理後的精子立即至現場進行人工授精測試，結果顯示其受精率為 50%、孵化率 85%，孵出雛雞於 3 週齡採血，以 PCR 檢測有
55%呈現陽性。
經檢測呈現陽性反應者每間隔 2 週持續採血一次，以追蹤外源抗胰蛋白瓷基因呈現陽性反應
的持續性。合計獲得 8 隻約 5 月齡之 G0 代基因轉殖雞，其基因組 DNA 經 PCR 檢測後之產物進一步進行基因定序分析，結果與 α1- 抗胰蛋白瓷基因序列比對有 99%的相似性，此結果顯示基因轉殖雞帶有 α1- 抗胰蛋白瓷基因，但在這些基因轉殖雞達 10 月齡左右之後，則外源基因無法再被檢出。