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- 期別
- 1999-032-1-0001-0015
- 作者
- 吳明哲、李秀美、駱亞欣、鄭翠雲、周佳樂
- 關鍵字
- 豬、卵巢、卵、急速冷凍、解凍法、體外成熟。
- 摘要
- 豬卵巢的冷凍保存研究，為癌症病患接受藥物和放射線療程前或保存健康卵巢再植回體，提供一項實驗動物模式。試驗一:把發身前女豬卵巢的濾泡卵依其回收過程所在的液相:濾泡液、20% 胎牛血清的磷酸緩衝液、或以40%Ethylene Glycol和18% Ficoll 70兩種溶液混合而成的EGF4018冷凍保護液中冷凍，解凍卵透明帶完整率分別為95.7%(67/70)、89.7%(130/145)和98.4%(186/189)，以及卵丘細胞層包被在透明帶外仍完整的比率為100.0%(67/67)、73.1%(95/130)和100.0%(186/186)。試驗二:把離體四至六小時的卵巢再保存於39℃恆溫培養箱、-20℃ 冰箱、或-196℃ 液態氮桶內，經24小時後再回收卵巢濾泡內的卵，其卵透明帶完整率均為100%，而卵丘細胞層包被完整率分別為70.3%(52/74)、63.3%(87/137)和20.4%(54/265)。卵在濾泡內被保存，不會因卵巢所保存的溫度而導致卵透明帶破損，但是卵透明帶外的卵丘細胞層會因冷凍而有片塊剝離情形。試驗三:卵巢先浸泡於EGF4018或3M DMSO冷凍保護液10分鐘後再冷凍，當在常溫解凍時，卵丘細胞層包被在透明帶外仍完整的比率分別為28.8% 和38.6%；而在70℃ 水浴槽內90秒解凍時，卵丘細胞層包被在透明帶外仍完整的比率分別為48.7% 和37.9%。試驗四:把30個卵巢直接丟入液態氮並保存35天後才解凍，有21%(109/522)的卵仍保有完好的卵丘細胞層包被在透明帶外，經體外成熟培養48小時後，僅剩3%(16/522)的卵是存活的，且可體外受精。試驗五:從EGF4018冷凍保護劑浸泡後冷凍的20個卵巢回收的卵經體外成熟培養48小時後，有10.9%(24/221)的卵存活，且經體外受精培養後有 2 個發育成四細胞胚。發身前女豬的卵巢可經急速冷凍保存一段時期後，再解凍回收其濾泡卵，卵的存活率雖低但可以體外成熟培養與受精。
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