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- 期別
- 1997-030-1-0097-0109
- 作者
- 吳明哲、駱亞欣、劉振發
- 關鍵字
- 豬、胚、冷凍保存、品種、螢光染色。
- 摘要
- 豬胚冷凍保存將有助於豬種基因庫之建立和豬胚移置工作國際化之拓展。本試驗把豬胚置於含1.5 M甘油冷凍保護劑之麥管中,自25℃起以1℃/分的速率降溫-6.8℃,維持10分鐘的植冰後,改以0.3℃/分的速率降溫到-35℃,停留五分鐘後再將麥管直接置入液態氮中保存。解凍時將麥管自液態氮中取出並迅投入37℃水浴溫20秒,使之融解並以0.3M蔗糖溶液來透析出甘油後,進行鏡檢和24小時體外培養。冷凍胚存活率是以培養後可進一步發育的胚數所佔冷凍胚數之百分比表示之。試驗一比較自單細胞、雙細胞、四細胞、八細胞、桑椹、早期囊胚、擴張囊胚到孵化囊胚期的蘭嶼豬胚冷凍存活率,分別為19.2 (5/26)、0.0 (0/58)、6.8 (3/44)、6.5 (3/46)、26.3 (5/19)、5.9 (1/17)、36.1 (13/36)和75.6% (34/45)。試驗二比較蘭嶼、藍瑞斯和杜洛克種的擴張囊胚之冷凍存活率,分別為37.3 (19/51)、5.4 (6/110)和9.4% (5/53);以及比較蘭嶼、藍瑞斯和約克夏種的孵化囊胚之冷凍存活率,分別為51.5 (34/52)、21.4 (3/14)和0.0% (0/10)。存活並發育為擴張囊胚者經螢光染色後,其粒線體分佈呈現均勻或僅局部不均勻,大多數胚葉細胞核呈現頗一致的核相。本試驗結果顯示冷凍胚存活率有胚期與品種之差異存在。
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