:::
- 期別
- 2012-45-2-165-182
- 作者
- 楊鎮榮、林鈺婷、謝伊琳、陳立人、徐怡強
- 關鍵字
- 豬胚幹細胞、無血清、生長因子、體外培養
- 摘要
- 本試驗之目的在探討無血清培養系統對豬胚幹細胞體外增生、群落形成效率、未分化狀態之維持、
細胞毒性、分化多能性與細胞凋亡之影響，期建立穩定的無血清體外培養系統，做為胚幹細胞培養之用。本試驗以含有16%胎牛血清（fetal bovine serum, FBS）之幹細胞培養液為對照組，試驗組則為無FBS 或血清替代物（serum replacement, SR）的培養系統中，配合添加鹼性纖維母細胞生長因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）與轉化生長因子-β1（traforming growth factor-β1, TGF-β1），探討無血清培養系統對豬胚幹細胞生長之影響。試驗結果顯示：在無FBS 或SR 的培養系統中，添加bFGF 與TGF-β1等生長因子，雖然生長曲線、群落形成與維持分化之效率，與對照組添加相較下並無促進增生與維持群落形成之效果，然添加bFGF 與TGF-β1 生長因子後，對於培養時並未對豬胚幹細胞產生LDH 細胞毒性；以分化多能性抗體Oct-4、AP、SSEA-3、SSEA-4、TRA 1-60 與TRA 1-81 進行染色，顯示在添加生長因子bFGF 與TGF-β1 組均具陽性反應，故添加生長因子可維持豬胚幹細胞之分化多能性。利用流式細胞分析儀進行分析，發現添加bFGF 與TGF-β1 生長因子24、36 與48 h 後，豬胚幹細胞未出現細胞凋亡現象，因此在細胞毒性、分化多能性與細胞凋亡等特性上，則與添加16% FBS 培養系統無顯著之差異（P0.05）。基於上述結果，建議此一添加生長因子bFGF 與TGF-β1 之無血清培養系統，可作為未來豬胚幹細胞無血清培養之參考。
回頂部