蘭嶼豬 Oct-4 基因啟動子區域的選殖與 DNA 序列分析
- 期別
- 2006-039-2-0139-0148
- 作者
- 蕭振文、蔡麗卿、劉瑞珍、劉振發、戴謙、陳立人
- 關鍵字
- 胚幹細胞、Oct-4基因、豬、啟動子。i
- 摘要
- 本研究目在選殖蘭嶼豬(Sus barbatus)的Oct-4基因上游啟動子區並完成DNA序列分析，供後續載體構築與幹細胞分化多能性研究之用。試驗自蘭嶼豬靜脈採集全血，離心分離白血球並萃取基因組DNA做為聚合?連鎖反應(polymerase chain reaction, PCR)的模板，再設計擴增Oct-4基因啟動子區域的引子進行PCR。試驗結果顯示，PCR後獲得單一條3.1kb的複製片段，該條PCR產物經膠體回收後，選殖入pGEM-T Easy載體，並進行DNA序列分析與Basic Local Alignment Search Tool (BLAST)比對。結果顯示蘭嶼豬的Oct-4啟動子與NCBI資料庫的小鼠與人類比對，相似度分別為53%與57%，啟動子區域內部分的高GC組成區則具有高度相似的保留性。本試驗選殖的蘭嶼豬Oct-4基因啟動子，配合報導基因表現，將可發展成為監控或測試幹細胞分化多能性的重要檢測標記。