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- 期別
- 1998-031-1-0053-0067
- 作者
- 吳明哲、李秀美
- 關鍵字
- 豬、卵、胚、體外成熟、體外受精、體外培養。
- 摘要
- 豬卵自屠宰肉豬卵巢之成長濾泡收集，經體外成熟與受精後，再予以體外培養至八細胞胚期之過程，是豬胚體外生產的操作工作。試驗一:第一日下午三點起對豬死後一小時左右的卵巢，進行濾泡卵的回收，有卵丘細胞包被的卵才予以體外成熟培養，下午四點置放於 50 μl 的體外成熟培養小滴內，在有 5% 二氧化碳供應狀態的 39℃恆溫培養箱培養 41 小時。第三日早上九點前洗滌體外受精所需的精子並調整為 2×10的6次方 精子/ml 濃度備用。把每 10 個卵置放於含有咖啡因的體外受精用培養小滴中，加 50 μl 等量的稀釋精液後放入培養箱培養 6 小時。到下午三點取出，洗去卵丘細胞層外多餘的精子，再置放於體外培養小滴中繼續培養 42 小時或 66 小時，亦即第五日或第六日的上午九點檢視細胞分裂狀況。有 89.8%(3640/4050)的收集卵是有卵丘細胞包被者。整個體外生產過程中計有 1,898 個卵受到污染，污染發生率為 52%(1898/3640)。在加入精子後 48 小時的 652 個卵分別有 1.38% 和 3.53% 的卵發育為雙細胞胚和四細胞胚；而於 72 小時後的 1,090 個卵分別有 1.01、2.20 和 4.04% 的卵發育成雙細胞胚、四細胞胚和八細胞胚。試驗二:體外生產流程如試驗一，但改以 100 個卵置入 3 ml 培養液中為一培養單位，胚期評估時間為加入精子後的 50 小時。計有 2180 個卵被培養，污染發生率為 28%(600/2180)。卵於加入精子後 50 小時，體外生產胚的產製率有 15.38%(243/1580)。發育的 243 個胚分別有 28.81、32.92 和 38.27% 為雙細胞胚、四細胞胚和八細胞胚。
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