玻璃化冷凍保護劑與冷凍解凍程序對山羊胚解凍後續發育能力之影響
- 期別
- 2023-56-2-138-143
- 作者
- 康定傑、曾楷扉、黃曲佑、陳裕信、曲鳳翔、林信宏、邢相媛、沈朋志
- 關鍵字
- 胚移置、胚玻璃化冷凍、山羊
- 摘要
- 本研究之目的係比較二種胚玻璃化冷凍劑組成及冷凍程序，對不同發育階段山羊胚經冷凍解凍後之體內及體外發育能力之影響。試驗共觀察到99個黃體，回收71個胚( 桑葚胚18個，囊胚36個，發育中止胚17個)，分為兩組進行，每組之冷凍程序各含兩個階段，第一組為ethylene glycol (EG)+ dimethyl sulfoxide (DMSO) 與0.5 M 海藻糖(trehalose) 組( 7 個桑葚胚，15 個囊胚)：第一階段冷凍配方為10% EG，10% DMSO，平衡時間為5 min；第二階段16.5% EG、16.5% DMSO 及0.5 M trehalose，平衡時間45 s。第二組方法為EG + PG 組(11 個桑葚胚，21 個囊胚)：第一階段為2% EG、2% 丙二醇(propylene glycol, PG) 0.4 M 海藻糖，平衡時間12 min；第二階段為與17.5% EG、17.5% PG 及0.4 M 海藻糖，平衡時間30 s 結果顯示EG + PG 組於囊胚解凍後於38.8℃、5% CO2 及100% 飽和濕度條件之培養箱中進行培養2 h 後形態恢復率顯著較EG + DMSO 組佳(76.0 ± 2.0% vs. 66.7 ± 23.6%; P < 0.05)；另外，以EG + PG 組處理之桑葚胚及囊胚後續經胚移置後第45 天之懷孕率(66.7 ± 28.8% vs. 66.7 ± 57.7%) 及胚移置效率(60.0 ± 15.0% vs. 55.6 ± 19.2%) 則無顯著差異。綜合試驗結果顯示以EG + PG 組處理冷凍囊胚，解凍後經2 h 培養的恢復率較EG + DMSO 組為佳；惟經EG + PG 組處理之桑葚胚及囊胚於移置後45 天之懷孕率及移置胚發育率則無差異。EG + PG 之處理方法及策略可替代高毒性DMSO 之使用，並可用於桑葚胚及囊胚之冷凍及胚移置。